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國產(chǎn)固相萃取儀流動相時應(yīng)考慮的方面

更新時間:2016-01-12      點(diǎn)擊次數(shù):2105
   國產(chǎn)固相萃取儀是應(yīng)用為廣泛的非性鍵合相,它對各種類型的化合物都有很強(qiáng)的適應(yīng)能力。短鏈烷基鍵合相能用于性化合物的分離,而苯基鍵合相適用于分離芳香化合物。分離非性和性較弱的化合物可選擇非性鍵合相。利用特殊的反相色譜技術(shù),例如反相離子抑制技術(shù)和反相離子對色譜法等,非性鍵合相也可用于分離離子型或可離子化的化合物。
  個理想的國產(chǎn)固相萃取儀流動相溶劑應(yīng)具有低粘度、與檢測器兼容性好、易于得到純品和低毒性等特征。選好填料(固定相)后,強(qiáng)溶劑使溶質(zhì)在填料表面的吸附減少,相應(yīng)的容量因子k降低;而較弱的溶劑使溶質(zhì)在填料表面吸附增加,相應(yīng)的容量因子k升高。因此,k值是流動相組成的函數(shù)。塔板數(shù)N般與流動相的粘度成反比。所以選擇國產(chǎn)固相萃取儀流動相時應(yīng)考慮以下幾個方面:
  ①流動相應(yīng)不改變填料的任何性質(zhì)。低交聯(lián)度的離子交換樹脂和排阻色譜填料有時遇到某些有機(jī)相會溶脹或收縮,從而改變色譜柱填床的性質(zhì)。堿性流動相不能用于硅膠柱系統(tǒng)。酸性流動相不能用于氧化鋁、氧化鎂等吸附劑的柱系統(tǒng)。
  ②純度。色譜柱的壽命與大量流動相通過有關(guān),特別是當(dāng)溶劑所含雜質(zhì)在柱上積累時。
  ③必須與檢測器匹配。國產(chǎn)固相萃取儀使用UV檢測器時,所用流動相在檢測波長下應(yīng)沒有吸收,或吸收很小。當(dāng)使用示差折光檢測器時,應(yīng)選擇折光系數(shù)與樣品差別較大的溶劑作流動相,以提高靈敏度。
  ④粘度要低(應(yīng)<2cp)。高粘度溶劑會影響溶質(zhì)的擴(kuò)散、傳質(zhì),降低柱效,還會使柱壓降增加,使分離時間延長。選擇沸點(diǎn)在100℃以下的流動相。
  ⑤對樣品的溶解度要適宜。如果溶解度欠佳,國產(chǎn)固相萃取儀樣品會在柱頭沉淀,不但影響了純化分離,且會使柱子惡化。
  ⑥樣品易于回收。應(yīng)選用揮發(fā)性溶劑。
  國產(chǎn)固相萃取儀分離中等性和性較強(qiáng)的化合物可選擇性鍵合相。氰基鍵合相對雙鍵異構(gòu)體或含雙鍵數(shù)不等的環(huán)狀化合物的分離有較好的選擇性。氨基鍵合相具有較強(qiáng)的氫鍵結(jié)合能力,對某些多官能團(tuán)化合物如甾體、強(qiáng)心甙等有較好的分離能力;氨基鍵合相上的氨基能與糖類分子中的羥基產(chǎn)生選擇性相互作用,故國產(chǎn)固相萃取儀被廣泛用于糖類的分析,但它不能用于分離羰基化合物,如甾酮、還原糖等,因?yàn)樗鼈冎g會發(fā)生反應(yīng)生成堿。二醇基鍵合相適用于分離有機(jī)酸、甾體和蛋白質(zhì)。
  國產(chǎn)固相萃取儀進(jìn)樣器按照進(jìn)樣方式的不同,可分為三種:分別是隔膜式進(jìn)樣、注射器停流進(jìn)樣和六通閥進(jìn)樣。隔膜進(jìn)樣是指用微量注射器將樣品注入與色譜柱相連的進(jìn)樣頭內(nèi),可把樣品直接送到柱頭填充床的中心,死體積幾乎等于零,可以獲得佳的柱效,且價(jià)格便宜,操作方便。但不能在高壓下使用(如10MPA以上),此外隔膜容易吸附樣品產(chǎn)生記憶效應(yīng),國產(chǎn)固相萃取儀使進(jìn)樣重復(fù)性只能達(dá)到1~2%,常規(guī)分析使用受到限制。
 

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